刘婷婷1,王涛1,杨翼3,王泽建1,庄英萍1,2,储炬1,2,郭美锦1,2
1华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海
2上海生物制造技术协同创新中心,上海
3上海纽迈电子科技有限公司,上海
摘要:
为了建立一个高效的高产油微藻诱变育种流程,微藻中油脂含量快速和准确的测定在其中具有重要作用。在本研究中,首先利用低场核磁共振技术,建立了直接检测干藻粉和培养液中小球藻油脂含量的方法,其信号强度与细胞中油脂含量存在特异的线性关系,干藻粉和藻液中油脂含量与信号值拟合的R2均高于0.99,说明该方法用于小球藻油脂含量的检测是准确和可行的。同时该方法与传统油脂测量方法相比,具有快速、简便和准确等优点。但其通量不及尼罗红染色法,因此,我们开发了将尼罗红染色法用于初筛,低场核磁共振技术用于复筛的新型高通量藻种复合筛选方法,并将此筛选方法应用于一种异养高产油原壳小球藻的诱变育种过程中。首先从株诱变藻种中初筛得到株具有较高油脂含量的藻株,然后利用低场核磁共振技术复筛得到9株高产油性能的藻株,其中一株甘油三酯含量超过20%,比原始藻株提高1倍,培养h后培养液油脂浓度达到5g/L,证明此诱变育种流程不仅提高了筛选的效率还可靠且可行。
关键词:低场核磁共振,诱变育种流程,微藻,油脂检测
引言:
当今主要利用的石油资源是不可再生的,且会对环境造成污染,产生温室效应[1]。生物柴油(Biodiesel)是比较理想的可再生能源,其利用生物的光合作用进行合成,是一种新型碳中性的能源。利用微藻进行生物柴油原材料的开发和利用近年来受到全球广泛的白癜风的治疗药物白癜风的发病原因